本文采用 LAMP 等溫擴增技術(shù)檢測細菌,對其檢測靈敏度和重復性做了相關(guān)驗證。
如圖 1 所示,尺寸為 75 x 28 mm 的微流控芯片有多個反應井組成可用于多重檢測。其中,每個芯片含有 10 或 18 個井,每個井體積約 4 ul。
每個反應井通過自身的分配通道連接到一個公共的進樣通道上。同時每個反應井通過自身分配通道連接有一個疏水通氣孔。
圖 1
為了防止在LAMP擴增過程中產(chǎn)生交叉污染,如圖 2 所示,一個帶扣的專用塑料外殼被用來密封芯片樣品裝載口和排氣口。
芯片和外殼分別采用聚碳酸酯和尼龍注塑而成。
圖 2
在樣品加載過程中,采用移液器將反應混合物通過進樣通道推到各個分配通道進而進入多個反應井中。擴增所需的引物實現(xiàn)被埋在反應井中。
同時,芯片內(nèi)的空氣通過排氣孔排出,這使得所有反應井中的試劑分配均勻。
圖 3
芯片和匹配的卡殼結(jié)構(gòu)如圖 3 所示。
一個具備18個反應井的芯片的操作流程如圖 4 所示。
圖 4
芯片配套的儀器重約 7kg,其尺寸為 353 x 340 x 178 mm,主要由溫控模塊和成像模塊組成。
樣品加載完后,將芯片插入儀器上對應的四個插件槽之一。儀器中最多可同時進行四個樣品檢測。
圖 5
溫控模塊由用于加熱的半導體制冷器和用于溫度測量的熱電偶組成。
如圖 5 所示,為了實時對多個芯片進行成像,采用線性平移平臺來控制成像模塊的水平移動。
審核編輯:劉清
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原文標題:一種多重微流控芯片結(jié)合LAMP技術(shù)實現(xiàn)病原體檢測
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