那曲檬骨新材料有限公司

0
  • 聊天消息
  • 系統(tǒng)消息
  • 評論與回復(fù)
登錄后你可以
  • 下載海量資料
  • 學(xué)習(xí)在線課程
  • 觀看技術(shù)視頻
  • 寫文章/發(fā)帖/加入社區(qū)
會員中心
創(chuàng)作中心

完善資料讓更多小伙伴認(rèn)識你,還能領(lǐng)取20積分哦,立即完善>

3天內(nèi)不再提示

高通量測序技術(shù)及原理介紹

科技綠洲 ? 來源:網(wǎng)絡(luò)整理 ? 作者:網(wǎng)絡(luò)整理 ? 2024-02-03 14:46 ? 次閱讀

高通量測序技術(shù)是生物學(xué)領(lǐng)域中一種重要的分析工具,它可以快速、準(zhǔn)確地測定DNA序列或RNA序列。高通量測序技術(shù)的出現(xiàn),極大地促進(jìn)了基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)以及生物信息學(xué)等領(lǐng)域的發(fā)展。本文將從高通量測序技術(shù)的原理、流程以及應(yīng)用領(lǐng)域等方面進(jìn)行介紹。

一、高通量測序技術(shù)原理
高通量測序技術(shù)的原理主要包括DNA文庫構(gòu)建、測序方法選擇、DNA樣本擴(kuò)增、測序儀的使用以及數(shù)據(jù)分析等幾個(gè)重要步驟。下面將對每個(gè)步驟進(jìn)行詳細(xì)介紹。

  1. DNA文庫構(gòu)建
    DNA文庫構(gòu)建是高通量測序的第一步,其目的是將待測的DNA樣本轉(zhuǎn)化為可以被測序儀識別和測序的文庫。構(gòu)建DNA文庫的關(guān)鍵步驟包括DNA片段的切割、末端修復(fù)、連接測序接頭和PCR擴(kuò)增等。DNA片段的切割可以通過限制性酶切或隨機(jī)剪切等方法實(shí)現(xiàn),末端修復(fù)可以通過使用聚合酶和酶切修復(fù)酶進(jìn)行修復(fù),連接測序接頭可以使用適當(dāng)?shù)倪B接試劑進(jìn)行。
  2. 測序方法選擇
    高通量測序技術(shù)有多種測序方法,如傳統(tǒng)Sanger測序、Illumina測序、Ion Torrent測序等。每種方法的原理和操作步驟有所不同,選擇適合的測序方法可以根據(jù)研究目的、樣本數(shù)量和所需的測序深度等因素進(jìn)行。以Illumina測序?yàn)槔湓硎峭ㄟ^測序引物的結(jié)合和聚合酶的反應(yīng)來實(shí)現(xiàn)DNA鏈?zhǔn)綌U(kuò)增和測序。
  3. DNA樣本擴(kuò)增
    DNA樣本擴(kuò)增是為了獲得足夠數(shù)量的模板DNA,使其可以被測序儀有效地識別和測序。擴(kuò)增方法一般使用PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))或液滴數(shù)碼PCR(ddPCR)等技術(shù),可以在短時(shí)間內(nèi)得到大量的DNA模板。
  4. 測序儀的使用
    高通量測序儀是進(jìn)行高通量測序的核心設(shè)備,其主要功能是將DNA文庫中的DNA片段讀取和識別,并生成相應(yīng)的序列信息。現(xiàn)在常用的高通量測序儀有Illumina HiSeq、Ion Torrent PGM等。測序儀是通過測序通道中的內(nèi)部熒光信號電流信號等實(shí)時(shí)采集數(shù)據(jù),并將其轉(zhuǎn)化為測序結(jié)果。
  5. 數(shù)據(jù)分析
    高通量測序生成的原始數(shù)據(jù)通常是原始序列或有機(jī)化學(xué)物質(zhì)的堿基編碼,需要進(jìn)行后續(xù)的數(shù)據(jù)分析。數(shù)據(jù)分析的方法包括數(shù)據(jù)質(zhì)控、序列比對、變異檢測和功能注釋等。通過數(shù)據(jù)分析過程,可以對測序結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量評估、序列拼接、序列比對、變異檢測以及功能注釋等。

二、高通量測序技術(shù)流程
高通量測序技術(shù)的流程可以分為樣本準(zhǔn)備、文庫構(gòu)建、測序、數(shù)據(jù)分析和生物信息學(xué)分析等幾個(gè)步驟。

  1. 樣本準(zhǔn)備
    樣本準(zhǔn)備是高通量測序的第一步,其目的是從生物樣本中提取出DNA或RNA。樣本的來源可以是人體組織、細(xì)胞培養(yǎng)物、環(huán)境樣品等。提取的DNA或RNA需要有足夠的質(zhì)量和濃度來進(jìn)行后續(xù)的文庫構(gòu)建。
  2. 文庫構(gòu)建
    文庫構(gòu)建是將提取得到的DNA或RNA樣本轉(zhuǎn)化為可以被測序儀識別和測序的文庫。文庫構(gòu)建的步驟包括DNA或RNA片段的切割、末端修復(fù)、連接測序接頭和PCR擴(kuò)增。構(gòu)建好的文庫需要經(jīng)過測序儀質(zhì)檢后方可進(jìn)行后續(xù)測序。
  3. 測序
    測序是對文庫中的DNA或RNA進(jìn)行測序,生成相應(yīng)的測序結(jié)果。測序方法可以根據(jù)需要選擇合適的測序技術(shù),如Illumina測序、Ion Torrent測序等。每個(gè)測序儀都有其特定的使用要求和操作步驟,需要嚴(yán)格按照說明進(jìn)行操作。
  4. 數(shù)據(jù)分析
    測序儀生成的原始數(shù)據(jù)需要進(jìn)行后續(xù)的數(shù)據(jù)分析。數(shù)據(jù)分析的步驟包括數(shù)據(jù)質(zhì)控、序列比對、變異檢測和功能注釋等。數(shù)據(jù)分析需要使用專門的生物信息學(xué)軟件和數(shù)據(jù)庫,對測序結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量評估、序列拼接、序列比對、變異檢測以及功能注釋等。
  5. 生物信息學(xué)分析
    生物信息學(xué)分析是高通量測序的重要應(yīng)用之一,通過對測序結(jié)果的進(jìn)一步分析,可以獲得更多的生物學(xué)信息。生物信息學(xué)分析的方法包括轉(zhuǎn)錄組分析、基因組分析、差異表達(dá)分析、功能富集分析等。這些分析有助于對生物樣本的基因表達(dá)、突變情況以及功能注釋進(jìn)行深入解讀。

三、高通量測序技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域
高通量測序技術(shù)已廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域,包括基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、表觀遺傳學(xué)、病毒學(xué)、癌癥研究等。

  1. 基因組學(xué)
    高通量測序技術(shù)在基因組學(xué)研究中具有重要作用。通過對不同物種的基因組進(jìn)行測序和比對,可以揭示物種間的基因差異、基因定位以及基因結(jié)構(gòu)等信息。基因組學(xué)研究對于物種遺傳進(jìn)化、基因功能以及疾病相關(guān)基因等的研究具有重要意義。
  2. 轉(zhuǎn)錄組學(xué)
    轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究是對特定物種或組織中的基因轉(zhuǎn)錄情況進(jìn)行分析研究。高通量測序技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)全轉(zhuǎn)錄組的測序,并通過對不同組織或條件下的轉(zhuǎn)錄差異進(jìn)行分析,揭示基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制和功能以及尋找相應(yīng)的藥物靶點(diǎn)等。
  3. 表觀遺傳學(xué)
    表觀遺傳學(xué)研究揭示了在基因組水平上遺傳信息的調(diào)控。高通量測序技術(shù)可以用于對DNA甲基化、組蛋白修飾以及非編碼RNA等表觀遺傳標(biāo)記的研究,為理解表觀遺傳調(diào)控機(jī)制、疾病發(fā)生發(fā)展以及藥物研發(fā)提供重要依據(jù)。
  4. 病毒學(xué)和病原體學(xué)
    高通量測序技術(shù)在病毒學(xué)和病原體學(xué)研究中被廣泛應(yīng)用。通過對病毒和微生物基因組的測序分析,可以了解病毒傳播途徑、基因功能和突變模式等信息,對病毒溯源、傳播機(jī)制和疫苗設(shè)計(jì)等具有重要意義。
  5. 癌癥研究
    高通量測序技術(shù)在癌癥研究中的應(yīng)用也十分廣泛。通過對腫瘤組織和正常組織的測序比對,可以發(fā)現(xiàn)與癌癥相關(guān)的致病基因、突變基因以及分子標(biāo)記物等。這有助于診斷癌癥以及指導(dǎo)個(gè)體化治療策略的制定。

綜上所述,高通量測序技術(shù)已成為生物學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)重要技術(shù)。通過高通量測序技術(shù),可以獲得大量的生物序列信息,幫助研究者深入了解基因組和轉(zhuǎn)錄組的結(jié)構(gòu)和功能,以及疾病發(fā)生發(fā)展機(jī)制等。

聲明:本文內(nèi)容及配圖由入駐作者撰寫或者入駐合作網(wǎng)站授權(quán)轉(zhuǎn)載。文章觀點(diǎn)僅代表作者本人,不代表電子發(fā)燒友網(wǎng)立場。文章及其配圖僅供工程師學(xué)習(xí)之用,如有內(nèi)容侵權(quán)或者其他違規(guī)問題,請聯(lián)系本站處理。 舉報(bào)投訴
  • 高通
    +關(guān)注

    關(guān)注

    77

    文章

    7504

    瀏覽量

    191167
  • 編碼
    +關(guān)注

    關(guān)注

    6

    文章

    957

    瀏覽量

    54951
  • DNA
    DNA
    +關(guān)注

    關(guān)注

    0

    文章

    243

    瀏覽量

    31132
  • 模板
    +關(guān)注

    關(guān)注

    0

    文章

    108

    瀏覽量

    20608
  • 數(shù)據(jù)分析
    +關(guān)注

    關(guān)注

    2

    文章

    1461

    瀏覽量

    34165
收藏 人收藏

    評論

    相關(guān)推薦

    高通量測序數(shù)據(jù)分析:RNA-seq 精選資料分享

    的DNA序列及其注釋 GEO (Gene Expression Omnibus):收集整理各種表達(dá)芯片數(shù)據(jù),后來加入了甲基化、lncRNA、miRNA、CNV等其他芯片,還有高通量測序數(shù)據(jù)...
    發(fā)表于 07-26 07:30

    全基因組測序的優(yōu)勢 精選資料分享

    全基因組測序的優(yōu)勢目前,隨著高通量測序技術(shù)快速發(fā)展、測序成本的進(jìn)一步降低以及組裝方法的不斷完善,全基因組
    發(fā)表于 07-29 08:31

    研究首次實(shí)現(xiàn)高通量小RNA芯片非標(biāo)記檢測

    中科院蘇州納米技術(shù)與納米仿生研究所李炯課題組與生物物理所閻錫蘊(yùn)課題組合作,首次實(shí)現(xiàn)了高通量microRNA芯片的非標(biāo)記檢測,而其他芯片和測序技術(shù)需要數(shù)小時(shí)的手工操作才能完成
    發(fā)表于 10-17 09:12 ?734次閱讀

    高通量測序技術(shù)及原理介紹

    高通量測序技術(shù)(High-throughput sequencing)又稱“下一代”測序技術(shù)(“Next-generation” seque
    的頭像 發(fā)表于 02-28 13:49 ?8.3w次閱讀

    高通量測序常用名詞匯總

    高通量測序技術(shù)是對傳統(tǒng)測序一次革命性的改變,一次對幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定,因此在有些文獻(xiàn)中稱其為下一代測序
    的頭像 發(fā)表于 02-28 14:05 ?3965次閱讀

    高通量測序技術(shù)及其應(yīng)用

    目前,所說的高通量測序技術(shù)主要是指454Lifescience公司、ABI公司和Illumian公司推出的第二代測序技術(shù)以及HelicosH
    的頭像 發(fā)表于 02-28 14:24 ?1.6w次閱讀
    <b class='flag-5'>高通量</b><b class='flag-5'>測序</b><b class='flag-5'>技術(shù)</b>及其應(yīng)用

    高通量測序生物信息學(xué)分析

    高通量測序技術(shù)產(chǎn)生的DNA序列數(shù)據(jù)長度較短,而且數(shù)據(jù)量非常巨大。分析了高通量測序環(huán)境下大數(shù)據(jù)的挑戰(zhàn)和機(jī)遇,總結(jié)并討論了數(shù)據(jù)壓縮、宏基因組數(shù)據(jù)
    的頭像 發(fā)表于 02-28 14:43 ?1.6w次閱讀
    <b class='flag-5'>高通量</b><b class='flag-5'>測序</b>生物信息學(xué)分析

    高通量測序面臨的5大挑戰(zhàn)

    測序流程中,生成的模板和序列的質(zhì)量每天可通過用戶友好界面系統(tǒng)地監(jiān)控。這就保證了迅速發(fā)現(xiàn)并改正工作中的潛在問題。通常,質(zhì)量控制和質(zhì)量測評(qualitycontrol/qualityassessment,QC/QA)組共同應(yīng)用質(zhì)量檢測標(biāo)準(zhǔn)。
    的頭像 發(fā)表于 02-28 15:18 ?8023次閱讀
    <b class='flag-5'>高通量</b><b class='flag-5'>測序</b>面臨的5大挑戰(zhàn)

    高通量基因測序是什么_高通量測序的意義

    “普通的基因測序”應(yīng)該是指“常規(guī)DNA測序”吧,是用Sanger法進(jìn)行測序的方法。高通量測序的概念其實(shí)是一個(gè)相對的概念,在2000年的時(shí)候,
    的頭像 發(fā)表于 02-28 15:49 ?4w次閱讀

    什么是高通量單細(xì)胞RNA測序技術(shù)

    自2009年湯富酬研究員在Nature Methods首次報(bào)道其開創(chuàng)性工作以來,單細(xì)胞RNA測序技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,尤其是發(fā)育生物學(xué)和干細(xì)胞研究中展現(xiàn)出強(qiáng)大的應(yīng)用前景。隨著單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增方法的不斷優(yōu)化和核酸測序
    的頭像 發(fā)表于 04-25 13:50 ?9885次閱讀

    廈門大學(xué)研發(fā)出全新高通量單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序方法

    針對上述挑戰(zhàn),楊朝勇教授課題組開發(fā)了一種全新的高通量單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序新方法(Paired-seq)。Paired-seq通過將高效單細(xì)胞捕獲操控微流控芯片與DNA編碼微珠技術(shù)相結(jié)合,一次測序
    的頭像 發(fā)表于 06-02 11:06 ?3636次閱讀

    披荊斬棘,乘風(fēng)破浪——真邁生物高通量基因測序儀GenoLab發(fā)布

    自2005年首款高通量基因測序儀上市以來,基因測序平臺便成為了全產(chǎn)業(yè)鏈中規(guī)模最大、技術(shù)門檻最高、最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。隨著醫(yī)療健康行業(yè)對基因測序設(shè)備
    的頭像 發(fā)表于 10-21 16:54 ?2464次閱讀

    高通量測序中的“失相”問題

    每一種基于類似原理的測序方法,都存在這樣的現(xiàn)象。而在使用不同化學(xué)反應(yīng)的不同測序方法中,失相現(xiàn)象的特征也不盡相同。如要?jiǎng)?chuàng)建新的測序技術(shù),對其失相現(xiàn)象的充分理解是一個(gè)必須解決的主要問題。
    的頭像 發(fā)表于 01-14 17:21 ?3372次閱讀

    曙光計(jì)算服務(wù):高通量材料計(jì)算和篩選的概念介紹

    高通量材料計(jì)算和篩選是新材料數(shù)字化研發(fā)的一個(gè)重要手段,也是材料基因工程的重要內(nèi)容。然而有不少大眾對高通量材料計(jì)算和篩選的概念以及方法了解不多。在曙光計(jì)算服務(wù)的新一期直播中,我們將通過剖析高通量材料計(jì)算篩選案例,重點(diǎn)講述
    的頭像 發(fā)表于 12-08 09:08 ?3195次閱讀

    高通量生物分析技術(shù)之微流控芯片

    高通量生物分析技術(shù)是指同時(shí)對一個(gè)樣品中的多個(gè)指標(biāo)或者對多個(gè)樣品中的一個(gè)指標(biāo)同步進(jìn)行并行分析,以在最短的時(shí)間內(nèi)獲得最多的生物信息的新型分析技術(shù)。微流控芯片是高通量生物分析
    的頭像 發(fā)表于 11-14 15:50 ?274次閱讀
    中华百家乐官网的玩法技巧和规则| 百家乐官网的关键技巧| 平顶山市| 壹贰博百家乐官网娱乐城| 西游记百家乐官网娱乐城| 366百家乐赌博| 七胜百家乐官网娱乐城总统网上娱乐城大都会娱乐城赌场 | 線上投注| 百家乐官网翻天粤语下载| 百家乐官网韩泰阁| 百家乐2珠路投注法| 大发888下载新澳博| 永利博百家乐官网游戏| 太阳百家乐官网代理| 哪家百家乐优惠最好且信誉不错 | 百家乐官网高命中打法| 网上百家乐游戏下载| 华蓥市| 巴西百家乐官网的玩法技巧和规则| 澳门百家乐出千吗| 大发888存款方式| 网上百家乐官网有没有假| 百家乐视频官网| 百家乐官网娱乐网佣金| 月华百家乐的玩法技巧和规则| 百家乐10个人| 丰禾娱乐| 狮威百家乐官网赌场娱乐网规则| 威尼斯人娱乐城网站| 百家乐官网盛大娱乐城城| 678百家乐官网博彩赌场娱乐网规则| 大众百家乐的玩法技巧和规则 | 百家乐百家乐伴侣| 大发888收获| 百家乐官网赌场代理荐| 百家乐九| 墨尔本百家乐的玩法技巧和规则 | 百家乐人生信条漫谈| 金赞娱乐| 百家乐官网网页游戏| bet365手机版|