未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心嚴(yán)謹(jǐn)?shù)幕?a target="_blank">檢測(cè)流程包括如下步驟:樣本接收、核酸提取、文庫(kù)構(gòu)建、質(zhì)量控制、測(cè)序分析、測(cè)序數(shù)據(jù)處理、遺傳咨詢(xún)師解讀等標(biāo)準(zhǔn)步驟,為健康譜寫(xiě)精準(zhǔn)說(shuō)明書(shū)。
樣本接收
采集的血液標(biāo)本將被直接送到未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心基因?qū)嶒?yàn)室進(jìn)行分類(lèi),計(jì)算機(jī)錄入,然后送入核酸提取區(qū)進(jìn)行血漿分離程序。需要提到的是,未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心的采血管是來(lái)自美國(guó)streck公司的核心技術(shù),可在采血后常溫14天內(nèi)仍然保持血液不變質(zhì),管內(nèi)排除了DNA的核酸酶的介導(dǎo)降解,有助于cfDNA的整體穩(wěn)定。
核酸提取
負(fù)責(zé)cfDNA提取。在基因?qū)嶒?yàn)室血液通過(guò)高速離心的方式分離成血漿與血清,而在血漿中極其微量的cfDNA都將被完整保留下來(lái)。
這道程序首先有賴(lài)于未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心使用的Eppendorf 德國(guó)低溫高速離心機(jī),該離心機(jī)具有轉(zhuǎn)速穩(wěn)定,冷卻時(shí)間短的特點(diǎn),在10分鐘就內(nèi)完成高效的血漿分離程序,保障標(biāo)本在分離過(guò)程中不被損壞。再次,從已經(jīng)分離的血漿中提取微量的cfDNA,未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心采用美國(guó)Life公司的cfDNA提取盒,這個(gè)試劑盒能能讓未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心從每毫升血漿中提取出10ng的cfDNA,,也就是億分之一克的含量。
文庫(kù)構(gòu)建
所謂文庫(kù)構(gòu)建就是在未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心之前獲取的每個(gè)cfDNA上在納米級(jí)層次上連接上標(biāo)準(zhǔn)化DNA片段,通過(guò)這個(gè)步驟,cfDNA才能接入測(cè)序儀上樣格式進(jìn)行測(cè)試。這個(gè)過(guò)程也是通過(guò)測(cè)序儀配套的Life公司的文庫(kù)構(gòu)建試劑盒實(shí)現(xiàn)的,具有建庫(kù)高效率,標(biāo)準(zhǔn)化的特點(diǎn)。
質(zhì)量控制
最終測(cè)序之前,未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心的檢測(cè)環(huán)節(jié)是有質(zhì)量控制步驟的。未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心前端建立的文庫(kù),通過(guò)美國(guó)的 Agilent2100生物分析儀與美國(guó)Life 公司的Qubit3.0 熒光計(jì),檢測(cè)cfDNA是否已經(jīng)正確連接上了標(biāo)準(zhǔn)化的DNA接頭。這個(gè)識(shí)別過(guò)程也是納米級(jí)的,可以對(duì)單獨(dú)的未接上接頭的cfDNA分子進(jìn)行排查。如果不達(dá)標(biāo)準(zhǔn),未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心將進(jìn)行重新建庫(kù),未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心只對(duì)只有完整的接頭的cfDNA進(jìn)行測(cè)序分析。
測(cè)序分析
在測(cè)序分析區(qū),cfDNA將被注入測(cè)序儀器當(dāng)中,全自動(dòng)化完成其序列分析工作。未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心的測(cè)序儀采用的是美國(guó)Ion proton測(cè)序儀面向中國(guó)市場(chǎng)推出的DA8600型號(hào),該機(jī)器在美國(guó)具有FDA認(rèn)證,國(guó)內(nèi)也符合CFDA標(biāo)準(zhǔn),其高通量測(cè)序一次可測(cè)達(dá)80兆個(gè)DNA片段,得到10GB的DNA信息,完全可用于醫(yī)療級(jí)別的基因檢測(cè)服務(wù)。
測(cè)序數(shù)據(jù)處理
對(duì)于測(cè)序所得的DNA序列信息,未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心的專(zhuān)業(yè)生物信息工程師通過(guò)全球權(quán)威的UCSC,NCBI等基因數(shù)據(jù)庫(kù),對(duì)客戶(hù)的DNA信息進(jìn)行整合,與標(biāo)準(zhǔn)基因序列信息進(jìn)行對(duì)比,得出突變位點(diǎn)。
遺傳咨詢(xún)師解讀
未來(lái)再生醫(yī)學(xué)中心的遺傳咨詢(xún)師根據(jù)這些位點(diǎn),結(jié)合美國(guó)COSMIC,F(xiàn)DA等腫瘤突變、藥物注冊(cè)等數(shù)據(jù)庫(kù),出具標(biāo)準(zhǔn)化分析報(bào)告,為客戶(hù)的解讀其基因突變與疾病的關(guān)聯(lián)。
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